遺伝子欠損細胞の作製とその応用
岡田 英孝 (1), 黒崎 知博 (2)
(1) 関西医科大学産婦人科
(2) 関西医科大学肝臓研究所分子遺伝学部門
〒570-8506 守口市文園町1-10-15
要約: 生命科学の研究は分子生物学や発生工学の進歩に
より，ジーンターゲティング，あるいはノックアウトマウ
スを用いてのアプローチがなされている．私たちは遺伝子
の機能解析のためにエワトリB細胞株DT40をモデルシ
ステムとして用いている．DT40細胞は，高等真核細胞で
起こりにくい相同DNA組み替えをおこしやすく，DT40
細胞を用いて特定遺伝子の欠損細胞を容易に作製できる．
DT40細胞の研究は，従来のノックアウトマウスを用いて
の研究に比べ，実験のコストが安価であり，1つの遺伝子
のcDNA断片が得られてから迅速に遺伝子の機能解析を
することができる．ノックアウトマウスと比較してDT40
細胞ではカリオタイプを含め表現型が安定で維持しやすく，
その細胞の詳細な生化学的解析・細胞生物学的解析を行う
ことができる．さらに近傍にある複数の遺伝子のノックア
ウトマウスを作製することは困難であるが，DT40細胞で
は最大3種類の遺伝子を欠損させた細胞を作製することが
できる．またDT40細胞において致死的な変異の導入の際
にはテトラサイクリンを用いた on-off の系を導入する
Tet-on／Tet‐off gene expression system や Cre‐loxP シス
テムのようなコンディショナルミュータントを作製するこ
とができる．実際に特定遺伝子の欠損細胞株の作製により,
それぞれの分子の機能解析を行うことができる．次に欠損
細胞に変異の分子を戻すことにより，その分子の各部分の
機能検定をすることもできる．このようにDT40細胞は細
胞レベルでの研究の格好な手段を与えてくれる．
キーワード: ジーンターゲティング, DT40細胞, BCR, SHIP, コンディショナルミュータント
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